UFC203024 Millipore密理博Ultracel-30 離心超濾管30K

超濾是大分子脫鹽、濃縮Z方便的方法，重復性好，已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、外泌體、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作。

默克生命科學(xué)旗下品牌Millipore的Amicon Ultra超濾管采用離心方式快速處理樣品，是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是，在默克生命科學(xué)團隊推出超濾管中文說(shuō)明書(shū)（0.5、4、15）之前，我們發(fā)現近90%的使用者在選擇和使用過(guò)程中因為缺乏必要信息而沒(méi)有獲得Z佳體驗，更重要的是，寶貴的樣本會(huì )遭受本可避免的損失！

·  選對截留分子量，事半功倍

如果目的蛋白是120kDa，請問(wèn)應該選擇的超濾管規格是100k、50k，還是30k甚至10k？你采用1/2、1/3抑或1/6算法？這些沒(méi)有統一的說(shuō)法，是因為不同廠(chǎng)家對膜的截留分子量的定義不同。Millipore超濾管采用其*的再生纖維素膜，定義為：一個(gè)確定NMWL 的超濾膜應該截留至少90% 以上的這個(gè)大小的球形分子，即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel再生纖維素膜得率超過(guò)90%。請仔細查看以下Millipore*數據：

截留分子量選小啦！看到這個(gè)表，你是否發(fā)現原來(lái)抱怨Millipore超濾管流速偏慢的根源來(lái)自對Millipore截留分子量定義的誤解？膜孔徑要小于目的分子。因為樣品分子形狀不同，為了Z大化樣品的回收，對于沒(méi)有參考的樣品，可以初步選擇截留分子量約為目的分子分子量1/2的膜。

·  倒轉離心，Z大化回收率

收取體積已經(jīng)很小的濃縮好的樣品時(shí)，你會(huì )：

⊙ 購買(mǎi)尖細的槍頭，把樣品吸回來(lái)

⊙ 濃縮倍數低一點(diǎn)，以便用槍頭把樣品吸回來(lái)

⊙ 反轉離心回收，獲得Z高得率

后一個(gè)，你答對了么？

Millipore Amicon Ultra系列超濾管上樣體積有0.5/2/4/15/70mL等五種，除了采用低吸附的管材和低蛋白吸附的再生纖維素超濾膜，其中0.5mL、2mL和70mL的規格還特別設計了反轉回收模式，以便使已經(jīng)濃縮的樣品Z大化回收。現在你總該知道為什么收到產(chǎn)品時(shí)會(huì )有兩個(gè)外管了吧～

·  脫鹽濃縮，一個(gè)超濾管搞定

濃縮用超濾管，脫鹽用透析袋或脫鹽柱，這是很多實(shí)驗室一直沿用的實(shí)驗操作。其實(shí)呢，超濾管做“脫鹽+濃縮”，也是很多蛋白操作高手的小訣竅。Millipore中文*說(shuō)明書(shū)特別給大家提示了這個(gè)方法——用更少的工具和更短的時(shí)間，減少轉移誤操作和樣品損失，卻能獲得更好處理效果，你get了嗎？