Millipore通過(guò)聚合材料沉淀或拉伸制成的膜濾器,可用于多種應用(如過(guò)濾、空氣顆粒物監測)。濾膜性質(zhì)因其組成、制造方法、表面處理技術(shù)和孔徑而存在顯著(zhù)差異。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在推出超濾管中文說(shuō)明書(shū)(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現近90%的使用者在選擇和使用過(guò)程中因為缺乏必要信息而沒(méi)有獲得理想體驗,更重要的是,寶貴的樣本會(huì )遭受本可避免的損失。
超濾是大分子脫鹽、濃縮方便的方法,重復性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。
選對截留分子量,事半功倍:
如果目的蛋白是120kDa,請問(wèn)應該選擇的超濾管規格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒(méi)有統一的說(shuō)法,是因為不同廠(chǎng)家的膜的截留分子量的定義不同。Millipore的超濾管采用其*的再生纖維素膜,定義為:一個(gè)確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel®再生纖維素膜得率超過(guò)90%。
預過(guò)濾和深度過(guò)濾器:
1、預過(guò)濾:預過(guò)濾利用大孔徑膜濾器從樣品中去除大顆粒物(如污垢或沉積物),之后再利用孔徑更小的膜濾器進(jìn)一步過(guò)濾。在樣品制備過(guò)程中,可借助預過(guò)濾避免過(guò)濾器過(guò)早堵塞或結垢。
2、深度過(guò)濾器:深度過(guò)濾器可將顆粒物截留在內部,而非過(guò)濾器表面。由于具有較高的顆粒截留能力,深度過(guò)濾器常用于預過(guò)濾。
3、粘合劑:粘合劑常用于非織造纖維基材料,可為最終產(chǎn)品提供塑形和強度。盡管玻璃纖維過(guò)濾器常使用粘合劑,但這類(lèi)添加成分會(huì )降低熱穩定性,并可能導致可溶出物污染樣品。
4、濾網(wǎng):濾網(wǎng)具有尺寸均勻的大孔徑和網(wǎng)狀結構,用于去除大顆粒物(如細胞、蛋白質(zhì)、污垢),以澄清顆粒物分析溶液。